Секвенирование ДНК | Ralzo
г. Москва, Мясницкая ул., 49
Режим работы:
Пн-Вс: 9.00-22.00

Секвенирование ДНК

Главной задачей генетики и биоинформатики является полно прочтение всей цепочки ДНК в том порядке в котором она сформирована изначально в клеточном ядре. Это даст ключ к пониманию многих процессов в организме, механизмов передачи наследственной информации, клонирования и генной модификации.

Структура ДНК

Для начала давайте разберемся, что представляет собой эта молекула. ДНК является макромолекулой дезоксирибонуклеиновой кислоты. У человека она состоит их двух нитей, закрученных в спираль, как правило право ориентированных. Эти нити имеют в своем составе нуклеотиды, которые называются по содержащимся в них азотистым основаниям: аденин (А), тимин (Т), гуанин (Г), цитозин (Ц). Основания нитей связаны друг с другом водородными связями. Но это не случайные последовательности. Связи образованы по принципу комплиментарности и только так, то есть А будет связан с Т, а Ц будет связан с Г. Такой принцип взаимодействия позволяет генетикам разрывать эти связи и правильно проводить репликацию (копирование). В идеальном варианте для исследования ДНК нужно вытянуть целиком молекулу в длинную нить и нуклеотид за нуклеотидом прочитать ее. К сожалению, сейчас нет доступных методов анализа, позволяющих проводить подобные манипуляции.

Секвенирование ДНК

Секвенирование - это метод исследования молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты, который позволяет определить ее состав (последовательность нуклеотидов). Современные методы секвенирования построены на разделении ДНК на участки, клонирование этих участков и затем уже их анализ. Для наглядности представьте, что ДНК положили в блендер, а затем протестировали каждый кусочек. Клонирование сильно облегчило открытие полимеразной цепной реакции (ПЦР) Кэрри Мулисом в 1983 году, за которую он впоследствии получил Нобелевскую премию. Это была революция в амплификации ДНК. Суть методики заключается в следующем. Молекулу денатурируют, то есть разрушают водородные связи с получением отдельных нитей. Затем на эти нити сажают специальные праймеры. Это короткие участки ДНК к которым может присоединяться полимераза, которая собственно и осуществляет репликацию. После копирования полимеразой ДНК, процесс повторяется: денатурация-праймеры-полимераза-копирование. Таким образом количесво исходной дезоксирибонуклеиновой кислоты растет в геометрической прогрессии: 2, 4, 8 и так далее. Этот механизм осуществляется с помощью специальных приборов - амплификаторов. Суть которых в цикличном изменении температуру нагрева реакционной смеси.

Секвенирование по Сэнгеру

Это был первый метод секвенирования полного генома, в том числе человеческого. Суть методики в том, чтобы разбить клонированную ДНК на через части, которые затем помещаются в реакционную смесь. Эта смесь содержит следующие компоненты:
  • Полимераза. Она отвечает за репликацию.
  • Праймеры. Короткие участки ДНК, инициирующие процесс репликации.
  • Смесь четырех нуклеотидов.
  • Особая вариации нуклеотида, прекращающая дальнейшее копирование ДНК.
Благодаря этим “стоп” нуклеотидам нить может образовать водородную связь, но не продолжается дальше. В результате образуется большое число копий днк разной длинны, которые заканчиваются на один и тот же “стоп” нуклеотид. Далее измеряется длина всех префиксов.

Секвенирование второго поколения

Современные секвенаторы разбивают ДНК на большое количество участков. На них затем сажаются специальные адаптеры с известной последовательностью нуклеотидов. Реакционная смесь помещается на специальную подложку с участками ДНК, к эти местам и прикрепляются адаптеры. Затем за счет клонирования и аккумуляции участков ДНК вокруг этих точек получаются целые кластеры ДНК. После разрушения водородных связей подложку помещают в раствор ДНК-полимеразы и специальных нуклеотидов, завершающих процесс репликации. Затем лишние нуклеотиды смывают, а метки считывают с помощью специального детектора. Современные ДНК лаборатории используют новейшие секвенаторы, содержащие по 8 или 24 капилляра. Таким образом можно за один цикл исследовать большое количество образцов. Генетический центр «Ралзо» относится к передовой компании. Оборудование нашей лаборатории отвечает всем критериям надежной и точной лаборатории. А опыт экспертов насчитывает более десяти лет.

Получить бесплатную консультацию специалиста

ЗАКАЗАТЬ ОБРАТНЫЙ ЗВОНОК

ВЫЗВАТЬ КУРЬЕРА

ПОЛУЧИТЬ НАБОР

СДАТЬ В ЦЕНТРЕ

ОСТАВИТЬ ОТЗЫВ

Выберите ваш город
Выбор города необходим для правильного расчета стоимости доставки, а также для отображения стоимости товаров в вашем регионе.


ОФОРМИТЬ ЗАКАЗ











ЗАКАЗАТЬ ТЕСТ

Наш сайт использует файлы cookies, чтобы улучшить работу и повысить эффективность сайта. Продолжая работу с сайтом, вы соглашаетесь с использованием нами cookies и политикой конфиденциальности.

Принять